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(1)熒光原位雜交(FISH)
熒光原位雜交是最早興起的在環(huán)境領(lǐng)域分析菌群豐度及半定量的工具。相比傳統(tǒng)的純培養(yǎng)技術(shù)而言,FISH的要求較低,可靠性高。而且PAOs本身不能定義為一種菌種,它不是單一菌種它本身不能被純培養(yǎng),純培養(yǎng)是一個工藝外的富集過程。
(2)PCR-DGGE技術(shù)
DGGE技術(shù)更為直觀有力,利用聚丙烯酰胺膠。條帶與膠相結(jié)合,清晰地反應(yīng)出主要種屬及它們的分布情況。通過普通PCR的擴增,擴增結(jié)束做DGGE,由此可看出分布在各個反應(yīng)區(qū)的優(yōu)勢種屬。割取最好條帶做克隆測序。
(3)實時熒光PCR技術(shù)
通過添加熒光跟蹤,觀察熒光信號變化。PCR能實時看到反應(yīng)變化情況。實時熒光PCR可實現(xiàn)指定菌的定量分析。以前實時熒光PCR較多地被應(yīng)用于醫(yī)學(xué),現(xiàn)在它被較為廣泛地應(yīng)用于環(huán)境微生物的研究之中。實時熒光PCR屬于高精度儀器,反應(yīng)過程無需染色和電泳。它相比傳統(tǒng)的PCR技術(shù),具有可直接定量而且污染少的特點。
隨著人們對反硝化聚磷菌越來越多的認(rèn)識,以及分子生物學(xué)技術(shù)越來越成熟,人們對反應(yīng)機理的認(rèn)識與微觀聯(lián)系起來,對實際廢水工程的應(yīng)用有一定指導(dǎo)意義。
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【文章來源:工業(yè)廢水處理中反硝化聚磷菌的分子生物學(xué)研究技術(shù) m.fsfs.com.cn】